LAMP(loop-mediated isothermal amplification),即環(huán)介導(dǎo)等溫擴增法,是一種新型的核酸擴增方法,其特點是針對靶基因的6個區(qū)域設(shè)計4種特異引物,在鏈置換DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)的作用下,60-65℃恒溫擴增,15-60分鐘左右即可實現(xiàn)10^9~10^10倍的核酸擴增,具有操作簡單、特異性強、產(chǎn)物易檢測等特點。
在DNA合成時,從脫氧核糖核酸三磷酸底物(dNTPs)中析出的焦磷酸離子與反應(yīng)溶液中的鎂離子反應(yīng),產(chǎn)生大量焦磷酸鎂沉淀,呈現(xiàn)白色。因此,可以把渾濁度作為反應(yīng)的指標,只用肉眼觀察白色渾濁沉淀,就能鑒定擴增與否,而不需要繁瑣的電泳和紫外觀察。由于環(huán)介導(dǎo)等溫擴增反應(yīng)不需要PCR儀和昂貴的試劑,有著廣泛的應(yīng)用前景。